DNA 정제 방법

미공성 매트릭스에 결합

이 방법의 예는 다음과 같습니다.

  • 고염 농축 완충액을 사용하여 DNA를 실리카 매트릭스에 결합한 후 저염 농축 완충액을 사용하여 용출합니다.   
  • 음이온 교환 멤브레인을 사용하는 이온 교환 크로마토그래피입니다.

Mustang 음이온 및 양이온 멤브레인 흡착기Pall은 Mustang™ 음이온 및 양이온 멤브레인 흡착기 형태의 독특한 멤브레인 기술을 개발했습니다. 이 기술을 통해 이온 교환 크로마토그래피로 핵산과 단백질을 정제할 수 있습니다. Mustang 제품 라인은 이미 공정 스트림에서 핵산을 제거할 때 선호되는 기술이며 이 과정은 백신 등의 치료 제품에서 DNA를 제거하는 작업의 일부입니다. 또한 Mustang 멤브레인 흡착기 모듈을 활용하면 유전자 치료 제품으로 사용하는 플라스미드 DNA를 정제할 수 있는 것으로 입증된 바 있습니다. Pall에서 핵산 정제 간소화를 위해 개발한 신제품 중 다른 하나는 플라스미드 DNA를 정제할 수 있는 플라스미드 용해물 제거 플레이트입니다. 예를 들어 이 플레이트는 박테리아 또는 효모 클론 라이브러리에 속하는 진행 생물 염기 서열을 보존하는 벡터로 사용할 수 있습니다.
 









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크기 배제

UF(Ultrafiltration)는 액체에서 극히 작은 입자와 용해된 분자를 분리할 때 사용되는 멤브레인 분리 기법입니다. 분리의 1차 기준은 분자 크기이지만 분자 형태 및 전하와 같은 인자 역시 기준에 포함될 수 있습니다. 비멤브레인 공정에 비해 ultrafiltration는 쉽고 빠르며 비교적 저렴합니다. 분자량 크기 배제로 작동하는 멤브레인을 사용하는 Pall Nanosep® 장치로 핵산을 정제하는 방법은 이미 정립된 방법이며, 어플리케이션 가이드 "Nanosep 원심 분리기 사용 프로토콜"에서 다룹니다. 이 방법으로 고수율의 정제 DNA를 빠르고 간편하게 회수할 수 있습니다. 정제가 필요한 생물 시료의 병렬 처리용 다중 웰 플레이트 형식에도 이 기술을 사용할 수 있습니다.

화학 추출

이 방법의 경우 클로로포름/페놀과 같은 용매를 사용하여 다공질 소재를 녹이고 DNA를 분할하여 후속 정제(예: 밀도 기울기 원심 분리 사용)합니다. 이 방법의 한계는 사용된 추출 용매로 인해 발생하는 폐기 문제와 회수된 DNA의 순도 및 수율입니다.